測蛋清和蛋黃中溶菌酶，，TC，TG和MDA等指標樣本怎么處理？

發(fā)布時(shí)間：2014/2/7 16:57:10　瀏覽次數：4402　[字號：大 中 小]　 [關(guān)閉此頁(yè)　打印此頁(yè)]

     要測蛋清和蛋黃中溶菌酶，，TC，TG和MDA等指標。我查到了文獻如下。

1、蛋清溶液的溶菌酶測定 

蛋清用0．9％氯化鈉稀釋?zhuān)宜嵴{溶液至pH 4．5，77℃水浴10 rain后取出，靜置1 h。離心取上清，按照標準曲線(xiàn)繪制的操作測得OD絲。值，由標準曲線(xiàn)回歸方程計算蛋清溶液中溶菌酶的含量(C)，再乘以稀釋倍數即為蛋清中溶菌酶的含量(P)。

其他的不知道怎么方法測？當時(shí)我買(mǎi)試劑盒的時(shí)候，說(shuō)清楚要測雞蛋的如上指標，但是發(fā)過(guò)來(lái)的試劑盒里面沒(méi)有詳細的說(shuō)明書(shū)，請你盡快吧詳細的說(shuō)明書(shū)和方法發(fā)給我吧，我現在只等著(zhù)，盡快吧。謝謝。。。

回復：對于您說(shuō)的這幾個(gè)指標，我們都是粗提取后進(jìn)行測定就可以了，并不需要進(jìn)行純化，  

因此我們的目的只需要將我們要測的物質(zhì)提取到液體中便可。

對于TC、TG、MDA的測定，老師可統一用無(wú)水乙醇進(jìn)行提取，如準確吸取蛋黃或蛋清體積1ml，加入4倍體積的無(wú)水乙醇（由于無(wú)水乙醇易揮發(fā)可選擇5ml或10ml帶蓋的EP管中操作），旋渦混勻器上充分混勻（抽提），3500轉/分，離心10分鐘，取上清進(jìn)行測定

對于溶菌酶的提取，雖然說(shuō)溶菌酶在弱酸性條件下活力最好，其次又耐高溫，但是我們并不需要如此操作，一般推薦直接用0.1mol/L pH7～7.4磷酸鹽緩沖液或生理鹽水直接提取便可，如準確吸取蛋黃或蛋清體積1ml，加入4倍體積的緩沖液，旋渦混勻器上充分混勻（抽提），3500轉/分，離心10分鐘，取上清進(jìn)行測定

          對于TC、TG的測定我之前都做過(guò)，但對于MDA、LZM的測定我們之前沒(méi)有做相關(guān)的樣本，僅是推薦。

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