白細胞介素-2（interleukin-2;IL-2 ）

發(fā)布時(shí)間：2014/2/14 15:16:52　瀏覽次數：10369　[字號：大 中 小]　 [關(guān)閉此頁(yè)　打印此頁(yè)]

其他名稱(chēng)：T細胞生長(cháng)因子(T cell growth factor,TCRF) 

定義：主要由活化的CD4+T細胞和CD8+T細胞產(chǎn)生的具有廣泛生物活性的細胞因子。是所有T細胞亞群的生長(cháng)因子，并可促進(jìn)活化B細胞增殖，故為調控免疫應答的重要因子，也參與抗體反應、造血和腫瘤監視。 

【中文名稱(chēng)】： 白細胞介素-2 

【簡(jiǎn)寫(xiě)拼音】： BXBJS-2 

【英文名稱(chēng)】： Interleukin-2 

【所屬類(lèi)別】： 免疫增強劑||其他抗腫瘤藥及輔助治療藥 

【別名】 白間素, 欣吉爾, T細胞生長(cháng)因子 ,白細胞介素-2 

【外文名】Interleukin-2 ,IL-2 

【適應癥】 白介素－2是一個(gè)分子量為14500的糖蛋白，它刺激已被特異性抗原或致絲裂因數啟動(dòng)的T細胞增殖。重組白介素－2可用于臨床研究。主要用于腎癌、黑色素瘤和非何杰金淋巴瘤有效（Rossenberg）。LAK細胞代表1個(gè)有單核巨噬細胞，B和T淋巴細胞特征的異原的細胞體。這些LAK細胞似乎對癌細胞有特異作用。此外，LAK細胞（不象T細胞）介導殺傷不受MHC的約束。[1] 

1 材料和方法：

　　1.1 制備粗制IL-2無(wú)菌采血，肝素抗凝，用RPMI1640按1∶1將血液稀釋?zhuān)缓笾貙佑诜瓶梢好嫔?，? 500r/min離心30min，取白細胞層，用RPMI1640洗2次，按1～3×10細胞/ml濃度加入10%胎牛血清RPMI1640，注入一裝有磁棒的大瓶中，置37℃攪拌培養4天，取出，分裝于50ml離心管中，1 500r/min離心20min，棄上清液，將細胞懸浮于1%胎牛血清RPMI1640培養液中，使細胞濃度為106細胞/ml。同時(shí)加入純質(zhì)PHA1～2μg/ml以及多種B淋巴母細胞株，使其濃度為106細胞/ml，37℃攪拌培養18～24h后，取出以1500r/min離心30min，取上清，用045μg濾膜過(guò)濾除菌，濾液即為粗制IL-2。 

　2 制備精品IL2 

　　2.1 硫酸銨沉淀與真空濃縮透析：在4℃下將硫酸銨粉末按50%飽和量加入上述粗制IL-2中，攪拌2h，12000g離心30min，取上清液，再加入80%飽和硫酸銨，4℃過(guò)夜，次日以12000g離心30min，棄上清液，將沉淀溶于1% PEG 6 000的1∶2 PBS溶液(pH值73)中，置真空負壓濃縮透析器中透析濃縮至所需容量。 

　　2.2 Sephadex G100凝膠過(guò)濾：用2×180cm的過(guò)濾柱及PBS(同上)，以80ml/h流速過(guò)濾。將各管洗脫液用紫外分光光度計280nm檢測其OD值。同時(shí)將幾種不同分子量的標準蛋白也用相同條件過(guò)濾及檢測其OD值，繪出IL-2及標準蛋白OD值的曲線(xiàn)。將各管洗脫液過(guò)濾除菌后，作白細胞生物活性試驗，按試驗結果繪出曲線(xiàn)，找出具有最高IL2活性的幾管洗脫液，混合后，作下一步精制。 

　　2.3 BlueSepharose層析：將上述混合后的洗脫液加入BlueSepharose柱中，流速約15ml/h，按每管10ml收集流出液，當樣品全部流出柱中以后，用上述PBS洗滌樣品柱，再用梯度NaCl溶液(從0075mol/L至06mol/L NaCl的PBS溶液)洗脫，按2ml/管收集洗脫液。NaCl 溶液梯度及流速均由梯度混合器調節控制。洗脫完畢后，作各管OD值及NaCl濃度的測定。各管洗脫液過(guò)濾除菌后，作出生物活性測定。將峰值前后的數管洗脫液混合，即為精制的IL2。置－20℃冰箱保存。 

　　3 檢定 

　　3.1 活性測定用10%胎牛血清RPMI1640將上述IL2稀釋為50%、25%、125%、625%，而后再將每個(gè)百分濃度以及100%濃度的IL2倍比稀釋?zhuān)?∶2至1∶128，將每個(gè)稀釋度分別加入多孔板的孔中，每孔01ml。然后取CT6細胞株(小鼠的IL2依賴(lài)性T細胞株)，調整濃度為106細胞/ml，每孔加入01ml，同時(shí)用培養基代替IL2作對照。將多孔板培養24h后，取出按每孔1μci的濃度加H3標記胸腺嘧啶核苷繼續培養4h。取出后用MESHⅡ細胞收集器過(guò)濾洗滌細胞，用β計數器測定各孔細胞的cpm。必要時(shí)按此結果繪出曲線(xiàn)，確定活性單位。 

　　3.2 蛋白含量測定采用分光光度計，分別測得OD280及OD260，然后按下式計算：蛋白含量(mg/ml)=(144×OD280-075×OD260)×稀釋倍數 

　　3.3 毒性試驗及細菌檢查參考胸腺肽制備部分。 

應用

【藥理作用】 本品可促進(jìn)T淋巴細胞增殖與分化，誘導具有細胞毒樣活力的殺傷細胞，誘導及增強殺傷性T細胞、單核細胞、巨噬細胞的活力等。 

【臨床應用】 適用于慢性活動(dòng)性乙型肝炎病毒感染等 

【用法用量】 靜脈滴注：每次2.5萬(wàn)-5萬(wàn)U，每日1次。 

【不良反應】 常見(jiàn)發(fā)熱、寒戰等反應。1.消化系統：惡心、嘔吐、腹瀉、結腸局部壞死或穿孔。 2.呼吸系統：可致間質(zhì)性肺水腫、呼吸性堿中毒。3.神經(jīng)系統：可發(fā)生行為變化、認知障礙。4.心血管系統：可出現低血壓、心動(dòng)過(guò)速、心律失常等癥狀。5.血液系統：可出現中性粒細胞上升，淋巴及單核細胞下降。6.泌尿系統：出現少尿、體液潴留、氨質(zhì)血癥?？沙霈F內分泌功能紊亂，血鈣、血磷下降，維生素C缺乏。 

【規格】 粉針劑:1000u,10000u, 10萬(wàn)u, 100萬(wàn)u. 

注意事項：癲癇、嚴重低血壓，心、腎功能不全，高熱者禁用。孕婦、患有心臟病或肺部疾病、60歲以上者慎用。用藥期間應定期查肝、腎功能。

Th1細胞,Th2細胞

白細胞介素-6,10,12,13